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DNS顯色劑 ,AR

別名: DNS顯色液 DNS試劑 3,5二硝基水楊酸溶液 DNS Reagent
Cas號: 物化性質:
分子式: 熔點:
分子量: 沸點:
EINECS編號: 密度:
MDL號: 儲存條件:

產品簡介
DNS即二硝基水楊酸法是利用堿性條件下,二硝基水楊酸(DNS)與還原糖發(fā)生氧化還原反應,生成3-氨基-5-硝基水楊酸,該產物在煮沸條件下顯棕紅色,且在一定濃度范圍內顏色深淺與還原糖含量成比例關系的原理,用比色法測定還原糖含量的。因其顯色的深淺只與糖類游離出還原基團的數(shù)量有關,而對還原糖的種類沒有選擇性,故DNS方法適合用在多糖(如纖維素、半纖維素和淀粉等)水解產生的多種還原糖體系中。

操作步驟(僅供參考):?
1、?還原糖的提?。?
2、?總糖的水解和提?。?br> 3、?制作葡萄糖標準曲線:取干凈離心管或試管,按下表進行操作,以0號調零,檢測540nm處吸光度,以吸光度值為縱坐標,各標準濃度(mg/ml)為橫坐標作圖得標準曲線。
 

加入物質(ml)? 0 1 2 3 4 5
Glu標準(1mg/ml) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
蒸餾水 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0
DNS試劑 2 2 2 2 2 2
沸水浴中5分鐘后取出,流水冷卻至室溫
蒸餾水 9 9 9 9 9 9
相當于葡萄糖量 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1


4、還原糖測定:取制備好的還原糖提取液或者總糖水解液1ml,分別加入DNS試劑2ml,其余操作同標準曲線的操作,540nm處測定各管的吸光度。

計算:??
還原糖的百分含量:?
還原糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs)×100????
總糖的百分含量:
總糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs)×100×10×0.9

注意事項:?
1、?上述低溫試劑避免反復凍融,以免失效或效率下降。?
2、?待測樣本如不能及時測定,應置于2~8℃保存,3天內穩(wěn)定。
3、?如果樣品還原糖濃度過高,應用蒸餾水稀釋后重測,結果乘以稀釋倍數(shù)。?
4、?總糖計算公式在測定干擾雜質很少、還原糖含量相對總糖含量很少時使用,×0.9是為了從測定出的總糖水解成單糖中,扣除水解時所消耗的水量。

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